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學(xué)做實(shí)驗(yàn)的方法初步入門-迷你離心機(jī)技術(shù)文章
實(shí)驗(yàn)方法：學(xué)做實(shí)驗(yàn)兩者方法有所不同，大概分為兩種方法：向別人學(xué)習(xí)和自學(xué)。下面分別介紹一下吧
基本操作和基礎(chǔ)知識(shí)
在開始學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有人指導(dǎo)。做實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容，大概分為基本操作和具體實(shí)驗(yàn)的操作?；静僮魇蔷唧w實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，例如：怎樣量取容積，怎樣測(cè)量和調(diào)節(jié)PH值，怎樣清洗實(shí)驗(yàn)室器皿，無菌操作技術(shù)，怎樣使用pipette，怎樣配置溶液，怎樣autoclave（高壓蒸汽滅菌）等。學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，應(yīng)該先學(xué)zui基本的操作，再學(xué)具體的實(shí)驗(yàn)。這些基本操作具有至關(guān)重要的作用，它直接決定了實(shí)驗(yàn)的成功率。
可以推薦幾本基本關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作的書。*本書是《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作手冊(cè)》（英文名At the bench: a laboratory navigator）。這本書是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門書籍，建議精讀三遍以上。本書中譯本大約300多頁，相對(duì)于將要介紹的其它幾本書籍要薄很多。它介紹了怎樣在實(shí)驗(yàn)室與他人相處，怎樣建立實(shí)驗(yàn)室，怎樣寫實(shí)驗(yàn)記錄，實(shí)驗(yàn)室的基本操作如試劑的配置、儲(chǔ)藏和處理，無菌技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)，離心，測(cè)PH值，電泳，顯微鏡的使用等?？偠灾?，本書基本上囊括了生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室日常遇到的問題和所有的基本操作，是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門書籍。
第二本書是《分子克隆》（英文名Molecular cloning: a laboratory manual），本書被譽(yù)為分子生物學(xué)的圣經(jīng)，幾乎每一個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都有一本。本書介紹了分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的基本原理和許多protocol。目前已經(jīng)出版到第三版。*版出版于 1982年，第二版出版于1989年，第三版出版于2001年。書中提供的protocol很經(jīng)典，但是有些目前已經(jīng)改進(jìn)了。這本書很厚，第三版英文版有2000多頁，所以幾乎不可能也沒有必要精讀所有章節(jié)，只要閱讀自己正在做的實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容就可以了。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》這本書從怎樣量取體積，稱取重量，測(cè)量PH值，測(cè)量濃度等zui基本的操作說起，講到配置溶液，細(xì)胞培養(yǎng)，PCR，樣本的準(zhǔn)備，層析，電泳，印跡實(shí)驗(yàn)，顯微鏡，酶促反應(yīng)（PCR等）。這本書共有737頁，講的是每天做實(shí)驗(yàn)都要遇到的問題，詳盡系統(tǒng)卻又簡(jiǎn)明易懂。對(duì)于希望學(xué)好做實(shí)驗(yàn)的人而言，本書必須仔細(xì)閱讀，對(duì)于希望成為實(shí)驗(yàn)高手的人而言，本書更應(yīng)該精讀。Current Protocol是Wiley出版社出版的一個(gè)實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)叢書，是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)典叢書之一，目前有16本，包括：Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等。
以上三本書各有特點(diǎn)。《At the bench: a laboratory navigator》為科普性質(zhì)，是對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)技術(shù)的粗略介紹，《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)技術(shù)的詳細(xì)介紹，而《Molecular Cloning》則是對(duì)具體實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)介紹。按照“柿子先撿軟的捏”的原則，建議先通讀《At the bench: a laboratory navigator》，再通讀《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及正在學(xué)習(xí)的具體實(shí)驗(yàn)的相關(guān)章節(jié)，加上閱讀《Molecular Cloning》正在學(xué)習(xí)的具體實(shí)驗(yàn)的相關(guān)章節(jié)。通讀的時(shí)候，標(biāo)出重點(diǎn)及自己的知識(shí)盲點(diǎn)，以后多復(fù)習(xí)重點(diǎn)和知識(shí)盲點(diǎn)幾遍直至了然于胸。
怎樣向別人學(xué)做實(shí)驗(yàn)
如果有人教做實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)效率會(huì)高很多。無論是向老師還是向師兄師姐學(xué)習(xí)，都需要注意別人的時(shí)間是寶貴的，所以盡可能一兩次學(xué)會(huì)。因此，在學(xué)習(xí)之前，先問清楚需要學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，自己先通過閱讀書籍，查閱網(wǎng)絡(luò)資料對(duì)該實(shí)驗(yàn)的原理和基本操作有一個(gè)大概的了解。好記性不如爛筆頭，在學(xué)習(xí)的時(shí)候，要帶上紙筆做記錄。遇到不懂的地方，不要因?yàn)橛X得不禮貌而將疑問存于心中，而應(yīng)該詢問清楚。實(shí)驗(yàn)的精髓不是一份簡(jiǎn)單的Protocol，而是實(shí)驗(yàn)的“心法”：關(guān)鍵步驟，注意事項(xiàng)，常見問題和解決方法。做任何一個(gè)實(shí)驗(yàn)，必須清楚關(guān)鍵步驟、注意事項(xiàng)、常見問題和解決方法。要清楚一個(gè)試劑的作用是什么，加多或者少加會(huì)有什么后果；一個(gè)步驟的目的是什么，時(shí)間太長(zhǎng)或者太短會(huì)怎樣等。在學(xué)習(xí)的時(shí)候，如果沒有教這些“心法”，自己應(yīng)該主動(dòng)請(qǐng)教，并記錄下來。
一開始學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，分三步走：老師示范，自己做老師看，自己獨(dú)立做。認(rèn)真的態(tài)度常常使別人樂于教你，如果自己無所謂，則別人會(huì)覺得教你是在浪費(fèi)時(shí)間。在開始學(xué)做一個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，及時(shí)、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄是非常必要的，如果實(shí)驗(yàn)失敗，這些記錄是分析失敗原因的重要依據(jù)。做完實(shí)驗(yàn)之后，要總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，記錄下來，并定期復(fù)習(xí)這些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)。總之，學(xué)做實(shí)驗(yàn)，遵循的步驟是：1。 預(yù)習(xí)。2。觀摩，記錄。3。自己操作。4。總結(jié)和復(fù)習(xí)。*次實(shí)驗(yàn)就成功，常常不是一件好事，因?yàn)榭赡軆H僅是運(yùn)氣好。多次失敗后的成功才是掌握了實(shí)驗(yàn)的可靠指標(biāo)。好的實(shí)驗(yàn)室常常有成熟的Protocol，不好的實(shí)驗(yàn)室，Protocol可能并不完善，需要自己摸索和調(diào)整。
怎樣自學(xué)做實(shí)驗(yàn)
不是每一個(gè)實(shí)驗(yàn)都有人教，需要自學(xué)的情況很常見。自學(xué)做實(shí)驗(yàn)，必須在掌握了實(shí)驗(yàn)的基本操作的基礎(chǔ)上進(jìn)行。自學(xué)實(shí)驗(yàn)，關(guān)鍵是要找到可行的protocol，并清楚實(shí)驗(yàn)原理，關(guān)鍵步驟，常見問題和解決方法。 我一般采取的程序是：首先用搜索引擎檢索實(shí)驗(yàn)原理，常見問題，注意事項(xiàng)等。把網(wǎng)上許多文章拷貝下來，仔細(xì)閱讀，找出重點(diǎn)，總結(jié)成簡(jiǎn)化版。然后，找一個(gè)好的protocol。Protocol可以從檢索，從書籍中找到，從別人的文獻(xiàn)中找，或者從生物公司的上找。這些方法下面分別介紹。找到不同的protocol進(jìn)行比較，分析為什么不同。通過比較，可以加深對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解。
如果系里或者認(rèn)識(shí)的人有正在學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)的專家，向?qū)＜艺?qǐng)教，可以節(jié)約不少時(shí)間。有時(shí)候，一個(gè)小小的細(xì)節(jié)問題就可以浪費(fèi)許多時(shí)間。
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